规模化猪场猪瘟净化实战方案

规 模 化 猪 场 猪 瘟 的 净 化 与 防 制

1 猪瘟流行背景

规 ****制猪瘟(Classical swine fever, CSF) 是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒感染引起, 是当前我国规模化猪场的主要传染病之一, 也是需要重点防控的重要传染病。根据2005年5月中华人民共和国农业部令第53号《动物病原微生物分类名录》, 猪瘟病毒分类于二类动物病原微生物, 属高致病性病原。值得注意的是, 虽然规模化猪场典型急性猪瘟大面积流行已不常见, 但猪瘟的发生尤其是非典型猪瘟仍然普遍存在, 而且由于诊断技术的缺陷往往造成对猪瘟疫情的忽视与误判。本文将介绍在规模化猪场的工作实践中猪瘟净化的必要性、有利条件以及净化策略。1 规模化猪场猪瘟的净化1.1 猪场 分别为我国北方、中部 以及南方3 个规模化种猪场, 地理条件和隔离措施良好, 饲养管理正规, 消毒措施严格, 基础母猪都在 600 头以上, 自繁自养。1.2 操作方法 分别用扁桃体活体采样法采取种猪扁桃体样品。在 1~2 d 内对整条生产线采样, 24 h 内低温送实验室进行检测, 在实验室做成触片, 采用猪瘟荧光抗体( 购自中国兽药监察所) 染色检测猪瘟病毒抗原,1~2 d 内检测完毕, 在检测报告送达 1~2 d 内一次性淘汰所有阳性猪。然后对整个繁殖群普遍免疫 1 次猪瘟弱毒组织苗( 成兔脾淋苗,2 头份/头), 以后每次所留后备猪都进行扁桃体活体检测, 阳性者不得作为种用。1.3 初步净化结果 3 个猪场猪瘟净化与检测结果如表 1 所示, 河北 A 猪场净化半年后检测, 阳性率下降 70.09%, 统计学分析(χ2 检验, SPSS 软件) 表明, 猪瘟带毒率明显下降。同时, 通过净化, 猪场的生产指标明显提高, 母猪分娩率提高 0.8%, 产活仔率提高4%, 窝均产活仔增加 1.3 头, 全期死亡率下降13.6%。河南B猪场间隔 5个月 2 次检测, 种猪猪瘟病毒阳性率下降 83.30%, 第 1 次检测淘汰后平均窝产健康仔猪由 9.28 头提高到 9.56 头, 生长猪成活率由 81.4%提高到 83.9%。在江西 C 规模化猪场, 笔者首先对整个繁殖群免疫 1 次猪瘟弱毒组织苗( 成兔脾淋苗, 2 头份 /头), 然后对繁殖障碍猪群进行检测与淘汰。第 2 次对全群进行检测, 结果猪群阳性率下降 90.20%, 同样淘汰阳性带毒种猪。在进行猪瘟净化的同时, 以 gE- ELISA 监测结果对猪群进行了伪狂犬病的净化, 并对猪繁殖与呼吸综合征采取针对性的防控措施。在很短的时间内, 繁殖群生产性能得到大幅度提高, 窝均产活仔数由 5.2 头提高到9.2头, 产死、残、弱仔比例由49.50%降至10.44%, 猪场生产效益得到极大提高。以上3个规模化猪场猪瘟的净化实践表明, 在规模化猪场采用“检测与淘汰”策略是控制猪瘟的有力措施。2 猪瘟净化的必要性2.1 猪瘟疫情在我国仍然普遍存在由于猪瘟兔化弱毒疫苗的广泛应用, 有效地控制了猪瘟的大面积流行, 但是现阶段猪瘟疫情仍然普遍存在。刘有昌等使用美国 IDEXX 公司生产的猪瘟病毒检测 ELISA 试剂盒, 于 2005 年 1~8 月对河北、天津、北京、辽宁、内蒙古等地 10个猪场送检的600 多份种公、母猪血液样品进行猪瘟病毒检测发现, 10个猪场都存在带毒种猪, 各猪场除可疑猪外阳性率为 3%~70%, 在 10%~20%的较多, 平均达20.5%[1]。中国兽医药品监察所丘惠深研究员等近年来对我国 13个省、市 29个大、中型猪场的种猪进行了检测,扁桃体猪瘟荧光抗体染色技术结果显示,所有被检猪场都存在种猪猪瘟带毒, 全国种猪猪瘟抗原阳性率平均为 11.12%, 最高的可达 30.7%,最低为 4.4%[2]。卫秀余等利用酶标的方法于 2004 年对 234 个猪场的送检样品进行猪瘟抗原检测, 结果阳性 64 个, 阳性率达 27.4%; 而同时采用间接血凝方法对4735份血清检测, 结果合格率仅为 69.1%[3]。笔者于 2005 年对北方部分规模化猪场种猪带毒情况进行调查, 结果发现, 种猪带毒率为 5%~20%。此外,65%猪场弱仔以及保育猪猪瘟抗原临床上监测结果也呈现阳性[4]。说明我国猪场的母猪带毒现象是相当普遍的, 只是程度不同, 所以猪瘟仍然是现阶段规模化猪场必须重视的重要疫病。2.2 猪瘟的发生表现为种猪的繁殖障碍以及温和型特点由于免疫水平低下、低毒力猪瘟病毒常在或其它原因, 导致猪瘟病毒在种猪群形成持续感染, 猪瘟病毒在猪体内长期存在, 即可同时检测到猪瘟病毒抗体和抗原, 只有通过实验室方法, 才能检测出带毒猪。持续感染种猪表现为妊娠母猪带毒综合征和公 猪精液传播, 这是猪群中猪瘟疫情持续存在的根本原因。在临床上种猪除可能出现繁殖障碍外, 往往不表现明显的临床症状。但是, 繁殖母猪可能出现流产和产死胎、木乃伊胎及弱仔, 仔猪的先天性感染往往形成免疫耐受[5]。临床上经常发现, 部分种猪猪瘟病毒抗体及其它病原抗体水平极低, 但是抗原检测结果为阳性。如果带毒后备猪进入生产群, 则会在猪场形成猪瘟的恶性循环链, 因此要从源头上控制规模化猪场的猪瘟疫情, 则必须对种猪群进行净化[2]。2.3 规模化猪场猪瘟往往与其它疾病发生混合感染 近年来, 随着规模化养猪业的发展, 一些免疫抑制性传染病病原如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型给养猪生产带来极大的危害, 猪瘟病毒通常与这些病原形成混合感染,一方面加重了猪瘟的危害性,另一方面给确诊带来了困难。这就需要采取实验室方法鉴定病原的种类, 对特定的猪群进行具体分析,客观科学地分析疫情,在进行猪瘟净化的同时不可忽视其它病原的危害,采取综合防制措施。3 净化猪瘟的有利条件3.1 便利的活体采样技术由于带毒种猪是猪场猪瘟病毒持续存在的根本原因, 因此,对种猪采取“检测与淘汰”策略可以从源头上对猪瘟进行净化。目前, 国内已有专用的猪扁桃体活体采样器械, 可以非常便利对种猪进行活体采样。该方法简单易学, 每头猪钩取扁桃体样品约 30 mg, 置于低温保存, 然后送有条件的实验室采用免疫荧光或 PCR 方法检测猪瘟病毒抗原。需要注意的是采样部位必须准确, 同时, 每头猪采样后应及时消毒处理, 消毒剂一般可采用 2%~3%氢氧化钠或酚类消毒剂。3.2 高效、经济的猪瘟抗原抗体检测方法 必须指出的是, 目前一些猪场仅凭借抗体检测结果来监测猪瘟病毒, 甚至根据抗体效价的高低来对猪瘟进行诊断。实验室和临床实践表明, 抗体检测诊断存在较大的误区, 因为到目前为止, 现有的血清学方法还无法区分疫苗抗体和野毒抗体。因此仅凭借抗体效价高低来对猪瘟进行诊断, 结果往往不确定。所以, 猪瘟病毒持续感染种猪的检测必须侧重于病毒抗原的检测[6]。其中猪瘟病毒免疫荧光法为国家标准方法, 也是国际通用方法。通过荧光标记的抗体直接测定猪瘟病毒抗原, 带毒猪扁桃体隐窝上皮细胞胞浆呈现特异性荧光, 由于猪瘟兔化弱毒疫苗不会在猪体内形成持续感染, 因此, 免疫荧光法可以快速有效检测出持续带毒猪[6,7], 同时也可以批量检测样品, 检测成本相对较低。荧光抗体可从专门的机构订购,但对于结果的判定需要有一定的经验。采用免疫荧光法净化猪瘟已经在一些猪场取得成功,净化后猪瘟疫情得到有效控制[8,9]。检测抗原的 ELISA 方法的原理是双抗体夹心法, 以猪瘟病毒血清包被微量反应板, 与被检样品中猪瘟病毒抗原结合, 然后与猪瘟病毒特异的单克隆抗体形成夹心的上层, 采用辣根过氧化物酶检测,底物的吸光度与病毒抗原含量成正比。猪瘟病毒抗体检测方法包括 ELISA 以及间接血凝方法。ELISA 方法由于测定试剂和方法的标准化, 试验结果可以定量, 同时可以高通量检测样品,也逐渐被用于临床监测。但由于试剂盒大部分为进口, 因而成本相对较高, 样品处理的过程也比较复杂。需要注意的是, 试验检测过程需要严格设立阳性和阴性对照, 对于试验人员的技术要求也比较高。目前在国内测定猪瘟病毒抗体最常用的是间接血凝法, 该方法采用猪瘟病毒致敏红细胞直接测定血清抗体效价, 要求的设备比较简便, 结果判定直观,因而适于基层应用, 根据经验一般以 1∶ 16或 1∶32作为临界标准。需要注意的是, 抗体效价与保护力之间的关系尚无定论, 而且与其它血清学方法一样, 无法区分野毒抗体和疫苗抗体。但是通过定期的抗体监测可以及时了解猪群的免疫状况, 评价疫苗免疫效果。因而, 定期的抗体监测是猪场猪瘟综合防制措施中必不可少的重要环节。3.3 合格的猪瘟疫苗猪瘟兔化弱毒疫苗的应用实践表明, 现有的疫苗毒株对于毒力不同的田间毒株仍然具有坚强的保护力,也就是说不用怀疑疫苗毒株的效力。但是, 高效的疫苗毒株并不代表有效的商品疫苗。需要指出的是, 对免疫猪群仍然发生猪瘟的原因要进行具体分析, 种猪带毒和仔猪先天性感染是重要的原因。另外,不同厂家疫苗在生产过程中毒价可能存在一定的差异, 且疫苗在运输、保存、使用过程中措施不当会对疫苗的效果产生影响, 免疫程序不合理也是重要因素, 如母源抗体的干扰。鉴于目前猪瘟的流行现状, 对猪瘟进行净化的猪场仍然需要使用猪瘟疫苗,合格高效的猪瘟兔化弱毒疫苗对于净化猪群可提供有力的保护作用。4 总结与讨论 实践表明, 猪瘟仍然是当前规模化猪场需要重点防范的传染病, 而持续带毒猪是猪瘟发生过程中的关键因素, 因此,只要从种群上净化生产群, 对种猪采取“检测与淘汰”策略, 将会从源头上控制猪瘟在猪场的恶性循环链。规模化猪场应充分认识猪瘟流行的新特点, 更新观念, 着眼于猪场的长期发展,重点抓好种群的净化,通过对种群2~3次净化,对每批后备猪进行检测, 将显着降低种猪群的阳性率,从而从根本上控制猪瘟疫情。同时要充分认识到,猪瘟的防制是一项系统性的综合工程, 猪场应采取严格的生物安全措施, 控制人员、车辆、器械、治疗工具的机械传播, 加强消毒工作。要采用优质高效的猪瘟疫苗, 定期监测猪瘟抗体水平, 通过定期的监测建立适合本场的免疫程序并严格执行, 规模化猪场还应该建立定期的流行病学监测机制, 及时了解猪群疫病潜伏感染情况。在进行猪瘟净化的同时, 还要加强对猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征以及圆环病毒病等其它危害严重疫病的防制, 条件允许时, 可以对多种疫病同时净化, 真正建立一个健康、稳定的繁殖群,

猪瘟(Classical Swine Fever,CSF) 是由猪瘟病毒引起的猪的一种急性、热性、接触性传染病,被国际兽疫局列为A类传染病,是目前危害养猪业发展的主要传染病之一,也是给养猪业带来损失最直接和危害最为严重的疾病。不同品种和年龄的猪都对猪瘟病毒易感,30~50日龄的猪最为敏感,急性型的死亡率高达90%以上。造成巨大的经济损失。

将极其有效地提高生产效益和增强品牌形象。

近年来,丘惠深等采用扁桃体猪瘟荧光抗体染色技术,对全国13个省市29个中大型猪场的种猪进行猪瘟抗原检测,结果显示,所有被检猪场都存在种猪猪瘟带毒,猪瘟抗原阳性率平均为11.12%,最高达30.7%,最低为4.4%。杨汉春数据显示:2014年,全国25个地区的274个猪场22 104份血清猪瘟抗体合格率平均值仅为72%。

这种方法麻烦 。。。

谁的方法更简单。说说。**

山东农科院吴家强研究员报道:2015年来自山东各地的343份病料,猪瘟检出率为15.74%;来自山东各地的978份血清,猪瘟抗体合格率仅73.72%。齐鲁动物保健品有限公司检测室2015年1-12月份发病病料猪瘟抗原检测结果表明,猪瘟检出率还是居高不下。

图片 1

图1 2015年1-12月份抗原检测结果

2 中国猪瘟主要临床表现形式

目前,中国猪场猪瘟发病时大多表现形式为温和型猪瘟或非典型猪瘟。 温和型猪瘟是近些年猪瘟发生的主要形式,在临床上主要表现为:

1种猪持续感染 ( 亚临床隐性感染):种猪感染猪瘟病毒但不表现临床症状,可持续向外排毒,猪瘟病毒在猪体内长期存在,只有通过实验室方法,可同时检测到猪瘟病毒抗原和抗体; 

2公猪群往往不表现出明显的临床症状,但通过精液传播散毒 ;

3母猪群表现为繁殖障碍 ( 妊娠母猪带毒综合征 ),出现流产、早产、产死胎或木乃伊胎,不发情或不孕等;

4仔猪先天性感染 ( 胎盘垂直感染):出生后要么表现为衰弱、排稀便、陆续死亡;要么形成免疫耐受 ( 免疫力低下 )。

用合格猪瘟疫苗及正规操作进行免疫,抗体仍达不到保护水平,造成猪瘟时有发生,成为持续性感染的带毒猪,如果这些猪群被作为后备种猪培养就会形成新的带毒种猪群。这些带毒猪群同时进行水平传播,感染健康猪群。由于垂直传播和水平传播在一个规模化猪场反复交替进行,就会在猪场内部形成猪瘟的恶性循环链。

3 造成中国猪瘟现状的主要原因

1)种猪群带毒是造成繁殖障碍型猪瘟的主要原因;

2)后备种猪群带毒是造成猪瘟循环发生的关键因素;

3)带毒和持续性感染现象的存在是造成猪瘟免疫失败的主要根源。

4 目前猪瘟净化的主要检测方法

4.1 IFA
免疫荧光,世界动物卫生组织和许多国家地区将免疫荧光作为猪瘟的法定诊断方法。

4.2 ELISA
美国IDEXX所推广的一种方法,利用血清检测抗体方法,抗体阻断率低于50%者补免,6~8周后复检,抗体阻断率高于50%,选留,仍达不到50%者淘汰。

4.3 RT-PCR/荧光定量PCR方法
最近使用较多的方法,敏感性高,耗时短,但有一定比例的假阳性。

4.4 病毒分离法
金标准,但周期长,不适合做筛查使用。

5 猪瘟净化方案

猪瘟问题是当前养猪业所面临的重大实际问题,目前全世界养猪国家防治猪瘟的主要办法有2种,一是扑杀,二是免疫。

前者是以切断传染源的方式,后者是提高易感猪群对猪瘟的抵抗力。在我国,在同一猪场中各类猪群均可遭受猪瘟病毒感染的情况下,而且感染率高,通过采用全场扑杀的办法来控制和根除猪瘟明显是不符合我国国情的,而且难于实行。 

根据净化手段,笔者把猪瘟净化分为2大类:

5.1 局限性猪瘟净化
净化的重点在于种猪,适用于猪瘟流行区域广,带毒率高的国家与地区,如中国。

第一阶段:强化免疫,降低猪瘟病毒感染,提升猪群抗体合格率为主要目的。

按照免疫群体10%的比例抽检,要求:免疫种猪群抗体合格率≥90%,猪瘟病毒感染率≤10%,方可执行净化措施。不达标者仍需要进行强化免疫处理。

第二阶段:种猪群抗原、抗体普查,分群处理。

后备母猪、种公猪、经产母猪全群检测,后备母猪采集扁桃体、种公猪采集扁桃体或精液、经产母猪采集扁桃体或者脐带血(母猪所产仔猪以仔猪的脐带血收集到1个管中,编写母猪号)。采用免疫荧光/RT-PCT/荧光定量PCR等方法。对抗原阳性猪群,淘汰/扑杀;抗原阴性,但个体抗体阻断率≥50%的猪只,进入留种群;抗原阴性,但个体抗体阻断率<50%,则需要进入补免群,补免群检测抗体,抗体阻断率≥50%的猪只,进入留种群,仍<50%的个体,进入淘汰/捕杀群处理。

第三阶段:种猪群二次普查抗原、抗体,分群处理方法同第二阶段。

第四阶段:净化成功阶段,抗原、抗体抽测结果达标,猪群稳定,生产成绩提高。

两次普查:抗原均为阴性,个体抗体阻断率≥50%,群体合格率≥90%,判定达标。在达标基础上,每半年进行抽测,每次每群抽检数量30~60头;不足30头者全部检测。凡出现病原学阳性个体者对全群进行普检,并扑杀阳性猪;凡病原检测阴性的猪群,免疫抗体合格的猪继续留作种用,免疫抗体不合格的猪只进入补免群,检测仍不合格者,淘汰/捕杀处理。

5.2 严格猪瘟净化方案
主要以扑杀根除病原为主要手段,适用于猪瘟带毒率低,流行范围小的国家与地区,如美国、日本。均是此种方法予以根除净化。政府强力主导推行,各职能部门密切配合。

第一阶段:强化免疫,提高猪群免疫力
群体抗体合格率≥90%,猪瘟感染率≤2%,执行根除方案。

第二阶段:清除阶段

全面停止疫苗注射建立完善疫情监控体系;对猪瘟感染场进行全面扑杀,并对所有病例进行全面的流行病学调查结合加以阻绝;目标:消灭潜伏在无规定动物疫病区的猪瘟野
毒株,时间约为3~5年。

第三阶段:宣告扑灭阶段
目标:向国际社会宣告该国无规定动物疫病区,为消灭猪瘟地区,并协助养猪行业拓展国外市场。

期限:1~2年。

计时:停止免疫猪瘟疫苗且无猪瘟病例发生后1年开始计时,计时开始后继续进行监控并停止使用猪瘟疫苗;

方法:以血清学检测和其他检测措施确认持续无猪瘟地区宣告扑灭阶段。

6 讨论

实践证明,净化是当前有效控制猪瘟、消灭猪瘟的重要手段。在猪瘟污染的规模化猪场,实施以净化种猪和后备种猪为主的猪瘟综合防控措施是切实可行的。

猪瘟净化本质上就是攘外安内,则关键点为一是种源控制,切断传入风险;二是猪场留种后备控制、与感染种猪控制,消除内在威胁。

6.1 种源控制
1)引种控制:外购引种种猪严格隔离检测和猪场自繁自养后备种猪严格检测淘汰;外购种猪,引种种猪体重控制50kg左右,3~4月龄,隔离期满足90d以上(目前隔离期多在6周左右)。在隔离期检测2~3次,均严格阴性,方可合群;

2)种猪场必须强化管理:猪场净化不合格场,相关部门取消种猪场资质,杜绝种源污染,把隐患消灭于萌芽状态中。

6.2 留种后备与感染种猪控制
严格检测2~3次,结果一致阴性方可采用。通过强化免疫,降低感染率,淘汰抗原阳性后备种猪与已感染种猪,保证种猪群猪瘟稳定,从而整个猪场猪瘟保持稳定。

因此,想要从源头上对规模化猪场的猪瘟进行控制,就必须对种猪群进行净化。

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